檢測認(rèn)證人脈交流通訊錄
氯霉素快速檢測試劑盒
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- 品 牌:
- 艾瑞德生物
- 【測定原理】
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,樣本中的殘留物氯霉素和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭抗氯霉素抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含殘留物氯霉素的含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較可得出相應(yīng)殘留物氯霉素的含量。
【試劑盒技術(shù)指標(biāo)】
規(guī) 格:96孔/盒
靈 敏 度: 0.05ppb
檢測時間: 75min
樣本定量檢測下限:
腸 衣………………………………………………0.1ppb
蜂 蜜………………………………………………0.1ppb
牛 奶………………………………………………0.05ppb
尿液、血清…………………………………………0.1ppb
組織、肝臟……………………………………… 0.025ppb
飼 料………………………………………………0.15ppb
樣本回收率:
組織、肝臟………………………………………80%±10%
蜂蜜、腸衣………………………………………70%±10%
牛奶、飼料………………………………………85%±15%
尿液、血清………………………………………70%±10%
交叉反應(yīng)率
氯霉素……………………………………………… 100%
甲砜霉素…………………………………………… < 0.1%
氟甲砜霉素…………………………………………< 0.1%
【試劑盒組成】
1、 微量測試孔:1×96孔板(12條×8孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)液X6瓶:(1ml/瓶) 0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb
3、 酶標(biāo)記物 12ml……………………紅色帽
4、 抗體工作液 7ml…………………… 綠色帽
5、 底物 A 液 7ml…………………… 白色帽
6、 底物 B 液 7 ml…………………… 黑色帽
7、 終 止 液 7 ml…………………… 黃色帽
8、 20X濃縮洗滌液 40ml………………透明帽
9、 2X濃縮復(fù)溶液 50ml………………透明帽
【所用儀器、試劑】
具備的儀器:微孔板酶標(biāo)儀、氮氣吹干裝置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g )
微量移液器:單道 20μl-200μl、100μl-1000μl、多道 250μl
試 劑:乙酸乙酯、乙腈、正己烷、去離子水、亞硝基鐵氰化鈉、硫酸鋅、葡萄糖苷酸酶(Merck,Art.No.4114)、醋酸鈉、醋酸
【樣本前處理步驟】
樣本處理前須知
處理任何樣本時,都必須注意:
(a)本試劑盒所檢測的組織樣本包括:動物組織、
禽類和水產(chǎn)組織。eg:雞、鴨、牛、兔、魚、蝦等。
(b)實驗中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時要更換吸頭。
(c)實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈,必要時可對實驗器具進行清潔,以避免污染,干擾實驗結(jié)果。
樣本前處理需配制:
配液1、C液(牛奶樣本使用):
0.36M 亞硝基鐵氰化鈉(Na2Fe(CN)5?NO?2H2O)10.7g 亞硝 基鐵氰化鈉加去離子水100ml溶解。
配液2、D液(牛奶樣本使用):
1M硫酸鋅(ZnSO4?7H2O)28.8g硫酸鋅加去離子水100ml溶解。
配液3、 pH4.8 100mM醋酸鈉緩沖液(尿樣本使用):稱2.4g醋酸鈉和1.2ml醋酸加去離子水500ml溶解混合。
配液4、乙腈-水溶液 V乙腈:VH2O=84:16
配液5、 將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按1:1稀釋。(1份濃縮復(fù)溶掖+1份去離子水,用于抗體的稀釋和樣本提取后的復(fù)溶)。
(a)組織、肝臟樣本前處理方法
1、 用均質(zhì)器均質(zhì)組織樣本;
2、 稱3±0.05g樣本于離心管中,先加入3ml去離子水充分混勻再加入6ml乙酸乙酯,振蕩5min,室溫4000r/min以上,離心10min;
3、 取出4ml上層液體在氮氣流50-60℃水浴中干燥;
4、 加入1 ml正己烷溶解干燥的殘留物,再加1ml稀釋后的復(fù)溶液強烈振蕩混合30s,室溫4000r/min以上離心5min。
5、 取50 μl下層相用于分析。
樣本稀釋倍數(shù):0.5
(b)血清血漿
1、 取1ml血清或血漿至試管中,加2ml乙酸乙酯振蕩1min;
2、 靜置使水相與有機相分層或室溫4000r/min離心5min;
3、 移取上層的乙酸乙酯至另一試管中,用氮氣流50℃水浴中干燥;
4、 殘留物用1 ml稀釋后的復(fù)溶液溶解,混合30s;
5、 取50μl用于分析。
樣本稀釋倍數(shù):1
(c) 尿液
1、 移取2ml尿液到離心管中,加pH4.8 100mM醋酸鈉緩沖液0.5ml混合;
2、 加40μl葡萄糖苷酸酶(Merck,Art.No.4114)到稀釋的尿液中,在37℃水解至少2小時(或過夜);
3、 該溶液恢復(fù)至室溫后加入8ml乙酸乙酯混合1min;
4、 室溫4000r/min離心10min,取出4ml上層液體在氮氣下50~60℃干燥;
5、 用1ml稀釋后的復(fù)溶液溶解干燥的殘留物,混合30s;
6、 取50μl 用于分析。
樣本稀釋倍數(shù):1
(d)蜂蜜
1、 取2±0.05 g蜂蜜,放入離心管中,用4ml去離子水溶解;
2、 加入4ml乙酸乙酯上下振蕩5min;
3、 室溫4000r/min以上離心10min;
4、 移取2ml上層清澈液到另一離心管中,50-60℃氮氣流下干燥;
5、 用0.5ml稀釋后的復(fù)溶液溶解,混合30s;
6、 取50 μl用于分析。
樣本稀釋倍數(shù):0.5 檢測下限:0.025ppb
定量下限:0.1 ppb
注:我們推薦0.1 ppb為陽性樣本的cut off值。
蘇州艾瑞德生物科技有限公司
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- 江蘇省蘇州市東吳北路31號,吳中科技創(chuàng)業(yè)園B幢201室
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