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篤瑪豚鼠組織蛋白酶D(CTSD) ELISA 試劑盒產品說明

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品　　牌：
DM

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出廠價：
1 元/套

主要規格：
96T/48T

用　　途：
科研

豚鼠組織蛋白酶D(CTSD) ELISA 試劑盒篤瑪生物試劑盒操作注意事項： 1.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。 2.試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。 3.使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。 4.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。 5.洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。 6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 7.加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。 8.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。 9.底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。豚鼠組織蛋白酶D(CTSD) ELISA 試劑盒標本要求 1. 血清：室溫血液自然凝固10-20 分鐘后，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。 2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20 分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應再次離心。 3.尿液：用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。 4.細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。 5.培養細胞: 檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100 萬/ml 左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。 6.組織標本: 切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。 7.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融 8.不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。豚鼠組織蛋白酶D(CTSD) ELISA 試劑盒 ELISA 實驗步驟： 1.包被抗原：稀釋液pH 9.6 碳酸鹽緩沖液，多肽濃度2ug/ml，0.1ml/孔，4oC過夜，洗凈。 2.1%BSA (pH 9.6 碳酸鹽緩沖液) 封閉，0.1ml/孔，37oC1h，洗凈。 3.稀釋抗血清(可稀釋不同濃度) 0.1ml/孔，37oC 30分鐘，洗凈。 4.稀釋辣根過氧化物每標記的二抗0.1ml/孔，37oC 40分鐘，洗凈。 5.顯色：TMB顯色 A液：四甲基聯苯胺10mg 溶于DMF1ml中，再用pH5.0檸檬酸緩沖液稀釋100倍. B液：5ul加蒸餾水12.5ml 。終止液：2N硫酸 A液、B液各一滴，比光顯色10分鐘，終止液一滴。 6.450nm 波長測OD值

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楊燕燕

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