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篤瑪羊抗人Tf血清說明介紹

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品　　牌：
DM

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出廠價(jià)：
1 元/瓶

主要規(guī)格：
1ml*10支

用　　途：
科研

羊抗人Tf血清操作步驟試管法（改良 Mayer 法） 1、致敏羊紅細(xì)胞： 2%綿羊紅細(xì)胞加等量稀釋后的溶血素（ 1:2000），混勻，置 37℃水浴 30min。 2、稀釋血清：待測血清 0.2ml，加應(yīng)用液 3.8ml，稀釋度為 1:20。 3、配制溶血標(biāo)準(zhǔn)管：全溶血管:2%綿羊紅細(xì)胞 2ml 加 8ml 蒸餾水，混勻。 50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加緩沖液 2ml。 4、按表所示，依次加各成分于試管中，混勻，置 37℃水浴 30min，第 10 管為非溶血對照：補(bǔ)體 CH50 測定試管法 5、結(jié)果測定：取出試管， 2000r/min 離心 10min，對照管應(yīng)不溶血。肉眼比色，選與 50%溶血標(biāo)準(zhǔn)管相近二管，再用分光光度計(jì)測（波長 542nm、 0.5cm 比色杯） OD 值，確定與標(biāo)準(zhǔn)管最接近者為終點(diǎn)管，然后按下公式計(jì)算 CH50 值：血清補(bǔ)體 CH50（ U/ml） =（ 1/血清用量）×稀釋度。如第 5 管為終點(diǎn)管，測待測血清中CH50為66.7U/ml。血清補(bǔ)體CH50正常值為50-100U/ml。羊抗人Tf血清標(biāo)本的采集及保存 1.血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 3.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注：標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。標(biāo)本的稀釋原則：首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)，檢測的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中，應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。最后計(jì)算濃度時(shí)，稀釋了“N”倍，標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則：臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔100μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則：臨用前以辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔100μl），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。羊抗人Tf血清免責(zé)聲明 1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé)。 2. 嚴(yán)格按照說明書操作，實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。

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楊燕燕

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