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- 豚鼠血清
上海篤瑪生物科技有限公司是一家國(guó)內(nèi)合資集科研和生產(chǎn)為一體的專業(yè)化生物公司。專業(yè)提供各類進(jìn)口品牌,研發(fā)生產(chǎn)ELISA試劑盒、細(xì)胞株、抗體、耗材、培養(yǎng)基等產(chǎn)品,并提供實(shí)驗(yàn)外包,技術(shù)指導(dǎo),操作指導(dǎo),代做實(shí)驗(yàn),代做課題等技術(shù)服務(wù)。公司擁有世界水平的研發(fā)團(tuán)隊(duì)、技術(shù)、研發(fā)平臺(tái)及現(xiàn)代化的生產(chǎn)基地,生產(chǎn)各類科研用的產(chǎn)品。我們由衷的感謝海內(nèi)外科學(xué)家、感謝國(guó)內(nèi)外廣大科研工作者、學(xué)者予以我們鼎力的支持和理解,我們將在未來(lái)的工作中,百尺竿頭,發(fā)揮優(yōu)勢(shì),勇于開(kāi)拓、自主創(chuàng)新、敢為人先、鍥而不舍,在生命科學(xué)的道路上,不斷進(jìn)取,奮發(fā)努力,瞄準(zhǔn)國(guó)際生命科學(xué)的前沿,不斷創(chuàng)新研發(fā)新產(chǎn)品。為科研工作提供更好、更人性化的服務(wù)。
上海篤瑪生物技術(shù)有限公司擁有六大服務(wù)平臺(tái):生物樣品分析平臺(tái)、微陣列芯片平臺(tái)、新一代測(cè)序平臺(tái)、生物標(biāo)志物平臺(tái)、分子檢測(cè)平臺(tái)、生物信息平臺(tái),憑借高標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)平臺(tái)和多樣化的服務(wù)等競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì),公司向國(guó)內(nèi)外企業(yè)和相關(guān)單位提供系統(tǒng)的生物學(xué)研究全面解決方案。目前正在為多達(dá)18家跨國(guó)制藥企業(yè)(包括排名前10位的跨國(guó)制藥企業(yè))和超過(guò)3000家的國(guó)內(nèi)科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)院等提供基因表達(dá)譜、基因分型、比較基因組學(xué)、DNA甲基化miRNA、生物標(biāo)志物篩選及確認(rèn)、生物信息等技術(shù)服務(wù)。
篤瑪生物成立的初衷就定位于以人為本,以品質(zhì)取勝的理念,為我們國(guó)家生命科學(xué)研究做一些力所能及的工作。公司主要經(jīng)營(yíng)的產(chǎn)品有測(cè)試盒、標(biāo)準(zhǔn)品、有機(jī)試劑以及常用的進(jìn)口試劑品牌的代理,質(zhì)量保證。多年來(lái)我們一直堅(jiān)守著這個(gè)承諾,在工作中自始至終貫穿著為科研服務(wù)-這個(gè)一貫的宗旨。我們由衷的感謝海內(nèi)外科學(xué)家、感謝國(guó)內(nèi)外廣大科研工作者、學(xué)者予以我們鼎力的支持和理解,我們將在未來(lái)的工作中,百尺竿頭,發(fā)揮優(yōu)勢(shì),勇于開(kāi)拓、自主創(chuàng)新、敢為人先、鍥而不舍,在生命科學(xué)的道路上,不斷進(jìn)取,奮發(fā)努力,瞄準(zhǔn)國(guó)際生命科學(xué)的前沿,不斷創(chuàng)新研發(fā)新產(chǎn)品。為科研工作提供更好、更人性化的服務(wù)。
豚鼠血清
血清的保存注意事項(xiàng)
(1)需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過(guò)1個(gè)月.由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽?
(2)熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已完全解凍的血清.加熱過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分
(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)造成血清沉淀物顯著增多,而且還會(huì)影響血清的質(zhì)量.補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用, 平滑肌細(xì)胞收縮, 肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺, 增強(qiáng)吞噬作用, 促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化.
(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀.
(4)一般廠商提供的血清為無(wú)菌,無(wú)需再過(guò)濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過(guò)濾,切勿直接過(guò)濾血清.
(5)血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點(diǎn)":經(jīng)過(guò)熱處理過(guò)的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染.一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號(hào)的血清.
(6)切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì)破會(huì)而影響血清質(zhì)量.
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操作步驟
試管法(改良 Mayer 法)
1、致敏羊紅細(xì)胞: 2%綿羊紅細(xì)胞加等量稀釋后的溶血素( 1:2000),混勻,置 37℃水浴 30min。
2、稀釋血清:待測(cè)血清 0.2ml,加應(yīng)用液 3.8ml,稀釋度為 1:20。
3、配制溶血標(biāo)準(zhǔn)管:全溶血管:2%綿羊紅細(xì)胞 2ml 加 8ml 蒸餾水,混勻。
50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加緩沖液 2ml。
4、按表所示,依次加各成分于試管中,混勻,置 37℃水浴 30min, 第 10 管為非溶血對(duì)照:補(bǔ)體 CH50 測(cè)定試管法
5、結(jié)果測(cè)定:取出試管, 2000r/min 離心 10min,對(duì)照管應(yīng)不溶血。肉眼比色,選與 50%溶血標(biāo)準(zhǔn)管相近二管,再用分光光度計(jì)測(cè)(波長(zhǎng) 542nm、 0.5cm 比色杯) OD 值,確定與標(biāo)準(zhǔn)管最接近者為終點(diǎn)管,然后按下公式計(jì)算 CH50 值:
血清補(bǔ)體 CH50( U/ml) =( 1/血清用量)×稀釋度。
如第 5 管為終點(diǎn)管,測(cè)待測(cè)血清中CH50為66.7U/ml。血清補(bǔ)體CH50正常值為50-100U/ml。
上海篤瑪生物科技有限公司
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