檢測認證人脈交流通訊錄
- A549/FU耐藥細胞
細胞株名稱:A549/FU耐藥細胞人肺癌氟尿嘧啶耐藥株
種屬:人
組織來源:肺
微生物及支原體檢測:陰性
安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄
培養(yǎng)條件:A549/FU耐藥細胞
完全培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+1%P/S+1000ng/ml順鉑
血清我們推薦用:
GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。
培養(yǎng)條件:37.0Ccarbondioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細胞后,在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,低速離心,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液(注意不要吸出細胞),換10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1.低速離心,棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2.按6-8ml/瓶補加完全培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中(補加完全培養(yǎng)基至8到10ml)。如果沒有特別說明,收到細胞后的第一次傳代一般是一傳二。
注:1、觀察細胞最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下。
2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3、有些細胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
4、收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們聯(lián)系。
凍存方法:凍存液:90%胎牛血清,10%DMSO
儲存:液氮儲存
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