類(lèi)胡蘿卜素（carotenoids）是構(gòu)成植物葉、花和果實(shí)顏色的重要成分之一，只能由植物或微生物合成，是人體必需的營(yíng)養(yǎng)成分。在植物中，類(lèi)胡蘿卜素可以協(xié)助吸收光能；在動(dòng)物體內(nèi)，類(lèi)胡蘿卜素具有清除自由基、延緩衰老等功能。因此，類(lèi)胡蘿卜素的種類(lèi)和含量是評(píng)估水果和蔬菜品質(zhì)的重要參數(shù)。

    葉黃素（Lutein）屬于類(lèi)胡蘿卜素，是一種抗氧化劑，主要存在于蔬菜中。葉黃素能降低游離基在人體內(nèi)的傷害，從而防止機(jī)體衰老引發(fā)的各種疾病等。

    番茄紅素（lycopene from tomato）屬于類(lèi)胡蘿卜素，是天然色素。主要存在于西紅柿的成熟果實(shí)中。番茄紅素是最強(qiáng)抗氧化劑之一。番茄紅素能清除機(jī)體中的自由基，也可治療各種因衰老帶來(lái)的疾病等。

    β-胡蘿卜素（β-Carotene）屬于類(lèi)胡蘿卜素，是橘黃色脂溶性化合物及天然色素。β—胡蘿卜素是一種抗氧化劑，具有解毒作用，具有抗癌，抗氧化等功效，也能防止衰老帶來(lái)的各種疾病。

一、測(cè)定方法

采用乙醇或丙酮提取比色法測(cè)定類(lèi)胡蘿卜素、葉黃素、番茄紅素、β-胡蘿卜素含量

二、實(shí)驗(yàn)原理

類(lèi)胡蘿卜素提取液在645和663nm2個(gè)波段下的吸光值很小，因此用紫外分光光度計(jì)直接測(cè)定出443，472 和502nm3個(gè)波段下葉黃素、番茄紅素、β-胡蘿卜素的吸光值，然后用上述3種色素的吸光值，借助紫外分光光度計(jì)測(cè)定出類(lèi)胡蘿卜素提取液在440,645,663nm處的吸光值。

三、器材及試劑

分光光度計(jì)等；
石油醚、丙酮、無(wú)水硫酸鈉等。

四、實(shí)驗(yàn)步驟

①樣品處理

稱(chēng)取5g樣品，研磨充分，按一定比列加入石油醚、丙酮溶液及石英砂，提取類(lèi)胡蘿卜素。溶液反復(fù)過(guò)濾，取濾色，暗處保存待用。

②標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制作

分別精確配制1μg／ml的葉黃素溶液、1μg／ml的番茄紅素溶液和1μg／ml的β-胡蘿卜素溶液，超濾后上機(jī)。進(jìn)樣量分別為4，8，10，12，16，20μl，經(jīng)數(shù)據(jù)系統(tǒng)自動(dòng)處理，折算為相同體積不同樣液的質(zhì)量濃度，并以樣液質(zhì)量濃度為X軸、峰面積為Y軸分別制作葉黃素、番茄紅素、β-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，建立回歸方程。

③樣品測(cè)定

取制備好的樣液10μl注入高效液相色譜儀，在前述測(cè)定條件下記錄葉黃素、番茄紅素、β-胡蘿卜素的峰面積，依保留時(shí)間分別通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查得樣液中各組分的質(zhì)量濃度，用外標(biāo)法計(jì)算各組分含量。

五、結(jié)果分析

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)及吸光值分別計(jì)算類(lèi)胡蘿卜素總量、番茄紅素、β- 胡蘿卜素濃度。