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細胞劃痕是一種簡單易行的檢測細胞運動的方法,實驗成本低,可以用來檢測貼壁生長腫瘤細胞的侵襲轉移能力。
流程:
1.先用 marker 筆在 6 孔板背后,用直尺比著,均勻得劃橫線,大約每隔 0.5~1 cm 一道,橫穿過孔。每孔至少穿過 5 條線;
2.在空中加入約 5X105 個細胞,具體數量因細胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿;
3.第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜;
4.用 PBS 洗細胞 3 次,去處劃下的細胞,加入無血清培養基;
5.放入 37 度 5% CO2 培養箱,培養。按 0,6,12,24 小時取樣,拍照。
特點:
1.在一定程度上模擬了體內細胞遷移的過程。
2.非常適合研究細胞與胞外基質(ECM),細胞與細胞之間相互作用引起的細胞 遷移。
3.與包括活細胞成像在內的顯微鏡系統兼容,可用于分析細胞間的相互作用。
4.研究細胞遷移的體外實驗中最簡單的方法。
交付結果:
*實驗原始結果,包括實驗前后圖片
* 完整詳細的實驗報告