喹乙醇(Oiaqiiindox)，又稱喹酰胺醇，屬于喹噁啉類，冷水中微溶，甲醇、乙醇和氣仿中幾乎不溶。是一種化學合成抗菌促生長劑。因其具有廣譜抗菌效果 和促生長作用，作為飼料添加劑被廣泛用于畜禽及水 產品的養殖。大疳生物毒性試驗研究表明，喹乙醇可 在動物體內形成殘留，具有明顯的蓄積毒性和DNA 顯性損傷等毒副作用。基于可能對人體健康造成危害，歐盟委員會2788/98決議規定禁止喹乙醇的使 用。國內也對喹乙醇的使用童做了限制，并且為了 加強對喹乙醇的監控,制定了水產品、肉與肉制品、動物飼料中喹乙醇的檢測方法。近來與豬肉有關的食品安全問題頻發，為了能保證食品的安全，建立肉中 喹乙醇的測量方法是十分必要的。

　　目前，對于飼料、肉類以及水產品等食品中喹乙 醇的檢測方法主要有金標快速檢測、液相色譜法、超高效液相色譜、液相-質譜聯用技術。雖然液 相-質譜聯用技術被越來越多地應用于動物源性食品中禁用藥物的檢測，但其價格昂貴，檢測成本高，對 其普及發展有一定的限制;液相色譜儀則越來越多的 應用到基層的檢驗工作。本文針對豬肉的喹乙醇殘 留，建立了高效液相色譜檢測方法，并通過對樣品前處理等方面進行探討，希望能對相關的工作有一定的 幫助。

　　1材料與方法

　　1.1儀器與試劑

       AgilentllOOHPLC儀：四元泵，柱溫箱，DAD檢測器(二極管陣列檢測 器)。雙列四孔水浴鍋、禍旋混合器(GENIUS3)、旋轉蒸發器(HE-52)、臺式離心機、真空離心濃縮儀(ZLS -1)。乙腈(色譜純)、甲醉(色譜純)、正已烷(色譜 純)、實驗用水(符合GB/T 6682三級水和二級水的要 求)、喹乙醇(Fluka，純度96.1%,批號:33987)。

　　1.2方法

　　1.2.1標準溶液的配制標準儲備液：準確稱取 0.0010 g喹乙醇于10 ml容最瓶中，用甲醇定容至刻度，此標準溶液濃度100μg/ml。標準溶液使用液:分 別吸取標準溶液,用乙腈+水(10 +90)配制成濃度為

　　2.0 μg/ml、4.0μg/ml、8.0 μg/ml、10 μg/ml

　　的標準溶液使用液。

　　1.2.2 色譜條件

　　色譜柱：ODS柱(200 mm x 4.6 mm,5 μm);流動相：乙腈+水(10 +90);流速： 0.80ml/min;柱溫:35 ℃進樣量：20 μl;檢測波長：

　　380 nm;保留時間:5.53 min。

　　1.2.3 樣品前處理

　　稱取樣品4.0 g于50 ml具塞離心管中，加20 ml甲醉+水(1 +1)，混勻于60℃水浴10 min,5 000 r/min 離心10 min，取上清液到 100 ml分液漏斗中，再用甲醇10 ml提取一次,合并上 清液，用20 ml正已烷凈化，靜置10 min后，將下層液 體收集到旋轉蒸發瓶中。用10 ml甲醇洗正已烷層， 合并提取液,60℃旋轉至近1 ml,轉移到1.5 ml血清管中，用真空離心濃縮儀濃縮至1 ml以下，用甲醇定容到1 ml。渦旋，高速離心，取20 μl上清液上機分析。

　　2.結果與討論

　　2.1樣品前處理

　　樣品的前處理方法對喹乙醇的分析至關重要。喹乙醇在熱水中溶解度很大，而在有機 溶劑中溶解度較低,所以本文采用60℃水浴加熱的 方法進行提取。經與乙腈+水(80+20)作為提取液 進行比較，結果顯示采用熱水作為提取液的回收率 明顯較高。其中乙腈+水作為提取液的回收率在 60%左右，而熱水作為提取液的回收率在85%以上。 因為水溶液不易濃縮處理，故采用有機溶液和水進行 混合進行提取回收率在85%左右。通常用甲醇和乙膪做為提取液的有機部分，實驗表明：在相同分數的 水溶液其提取效果基本一致，由于乙腈毒性遠遠大于 甲醇，本文采用甲醉和水組成提取液。在甲醉和水的 體積比方面，分別進行了 20 +80、30 +70、40 +60、50 + 50、60+40、70 + 30、80 +20 實驗。在50 +50 以后 提取的效果一致,但隨著水體積的增加，旋轉濃縮的 時間加長，因此選用了甲醇+水(50 +50)的提取條 件。對于動物源性樣品，脂肪等雜質是主要的干擾物 質。加人正己烷進行凈化，不僅能有效地去除提取液中的水溶性雜質和脂肪,并且具有較強的脫色作用。 用甲醇凈化正已烷，可以提高回收率，從65%左右提

　　高到85%左右。

　　2.2方法的線性

　　方法測定用的標準曲線為 2.0 μg/mlN4.0μg/mlN6.0 μg/mlN8.0 μg/ml 10 μg/ml其測定的峰面積分別為99.3 mAU • s、199mAU·s、 299 mAU • s、391 mAU • s、486 mAU • s;

　　則喹乙醇的線性回歸方程:y =48.67x +2.50,相關系數r:0.9998。

　　喹乙醇標準溶液的色譜圖見圖1。

　　2.3方法精密度和回收率

       準確稱取4.0 g樣品作為 本底，添加2.0網、5.0網、9.0叫喹乙醇做加標回收 實驗，同時做6個平行樣,按分析步驟進樣樣品前處理 后，上機測定。

結果見表1,樣品加標譜圖見圖2。

　　本方法回收率在83.2% ~ 84.6%之間。用6個 加標后樣品測定值計算精密度值為1.2% ~ 2.2%.

　　2.4方法檢出限

　　基線點對點噪音為0.04 mAU,3 倍噪音時，對應濃度為0.01 μg/ml，當取4.0 g樣品 時，檢出限為40 μg/kg。

　　本方法檢出限低，回收率高，定性可靠，定景準 確，適合于豬肉中喳乙醉殘留的檢測。本實驗室用該 方法對本地區市場流通的25份豬肉進行了檢測，均未檢測出喹乙醇殘留。

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