檢測認證人脈交流通訊錄

負責人:劉翠 電話:020-39943080
主要規格及技術指標
1.芯片表面溫控精度:10×10-3℃
2.樣品分析時間:1min-24 h
3.樣品注射體積:4.17-2500μL
4.芯片位點間均一性:>98%
5.檢測折射率范圍:1.33-1.37
6.動態范圍:1-40000
7.結合常數范圍:103 - 3×106 1/Ms
8.解離常數范圍:10-5 - 10-1 s-1
9.平衡親和力:10-3- 10-12 M
10.檢測極限:< 1pM
11.濃度范圍(mol):10-3- 10-11 M
12.濃度范圍(質量):20mg/ml - 200 pg/ml
13.折射分辨率折射分辨率:1 x 10-6
14.最小分子重量小于:100Da
15.基線噪聲:<1RU
16.數據分析的曲線擬合有7種模型可選:
(1)Langmuir
(2)質量傳遞Langmuir
(3)二價分析物
(4)雙分析物競爭
(5)雙配體位點競爭
(6)變構結合
(7)基線漂移Langmuir
主要功能及特色
按分析物的種類分:
(1)蛋白—蛋白相互作用
(2)蛋白—多肽相互作用
(3)蛋白—小分子化合物相互作用
(4)核酸—蛋白相互作用
(5)多糖—蛋白相互作用
(6)核酸—小分子化合物相互作用
按分析方式分:
(1)動力學分析Ka、Kd、KD
(2)平衡(穩態)分析平衡常數KD
(3)濃度測定
(4)熱力學分析
(5)競爭結合
(6)終點分析
樣本檢測注意事項
用于ligand(標記分子)的樣品要求:
1.蛋白活性要高,如果是自己表達的樣品,請盡量新鮮制備;如果是購買的蛋白,盡量不要使用溶解后分裝凍存已經很長時間的樣品;
2.蛋白盡量純化,純度超過90%比較理想;
3.如果蛋白純化困難,并且analyte分子量超過5kD,可以考慮用抗體capture,如果這樣,用戶需要提供抗體,不接受未經任何提純處理的真核細胞裂解液;
4.純化后的蛋白溶液不要含有Tris、咪唑等含有氨基或亞氨基的化合物成分;
5.提供樣品分子量;
6.蛋白樣品請提供大致的等電點;
7.蛋白濃度盡量不低于30 mM(即微mol/L)。
8.樣品總量不少于10-15 nmol(摩爾數=質量/分子量)
9.如果樣品是核酸或多糖,請標記上biotin。
用于analyte(流動相分子)的樣品要求:
1.樣品應盡量純化,純度超過90%比較理想;
2.提供樣品分子量;
3.蛋白樣品如有可能,請提供大致等電點;
4.如果樣品是溶液,請提供準確的樣品濃度;
5.如果樣品是溶液,初始濃度可根據大致親和力水平調整:如果親和力可能較弱(KD>10-6 M),濃度不應低于10mM,如果親和力較強(KD<10-6 M),濃度可以低至10 mM;
6.如果樣品是粉末狀態,請提供準確質量和分子量信息以及溶解方式等;
7.樣品的總體積應當不少于10mL,最好能在50mL以上;
8.確保化合物在較低DMSO濃度的情況下具有良好的水溶解性。
緩沖液要求:
PBST緩沖液(10mM Na3PO4,150mM NaCl,0.01% Tween,pH=7.4),如果實驗有特殊要求,請提供緩沖液,緩沖液總量不少于2 L,要用0.2mm濾膜過濾。
請查閱與所要做的蛋白和小分子相關的SPR文獻。
設備使用相關說明
蛋白質相互作用儀利用SPR(Surface Plasmon Resonance)技術,即表面等離子共振技術,可以在天然狀態下反映蛋白質-蛋白質、蛋白質-核酸、新藥分子-疾病靶蛋白等生物分子相互作用,如特異結合、解離、分子識別等動力學過程,為實時、動態獲取生物分子互作信息,從而闡明生命現象的分子機理提供了有效的研究工具,有助于更加全面和深刻地理解生物分子的結構和功能。


