負責人：劉翠  電話：020-39943080

 

主要規格及技術指標

 

　　1.芯片表面溫控精度：10×10-3℃

 

　　2.樣品分析時間：1min-24 h

 

　　3.樣品注射體積：4.17-2500μL

 

　　4.芯片位點間均一性：>98%

 

　　5.檢測折射率范圍：1.33-1.37

 

　　6.動態范圍：1-40000

 

　　7.結合常數范圍：103 - 3×106 1/Ms

 

　　8.解離常數范圍：10-5 - 10-1 s-1

 

　　9.平衡親和力：10-3- 10-12 M

 

　　10.檢測極限：< 1pM

 

　　11.濃度范圍(mol)：10-3- 10-11 M

 

　　12.濃度范圍(質量)：20mg/ml - 200 pg/ml

 

　　13.折射分辨率折射分辨率：1 x 10-6

 

　　14.最小分子重量小于：100Da

 

　　15.基線噪聲：<1RU

 

　　16.數據分析的曲線擬合有7種模型可選：

 

　　(1)Langmuir

 

　　(2)質量傳遞Langmuir

 

　　(3)二價分析物

 

　　(4)雙分析物競爭

 

　　(5)雙配體位點競爭

 

　　(6)變構結合

 

　　(7)基線漂移Langmuir

 

　　主要功能及特色

 

　　按分析物的種類分：

 

　　(1)蛋白—蛋白相互作用

 

　　(2)蛋白—多肽相互作用

 

　　(3)蛋白—小分子化合物相互作用

 

　　(4)核酸—蛋白相互作用

 

　　(5)多糖—蛋白相互作用

 

　　(6)核酸—小分子化合物相互作用

 

　　按分析方式分：

 

　　(1)動力學分析Ka、Kd、KD

 

　　(2)平衡(穩態)分析平衡常數KD

 

　　(3)濃度測定

 

　　(4)熱力學分析

 

　　(5)競爭結合

 

　　(6)終點分析

 

樣本檢測注意事項

 

　　用于ligand(標記分子)的樣品要求：

 

　　1.蛋白活性要高，如果是自己表達的樣品，請盡量新鮮制備；如果是購買的蛋白，盡量不要使用溶解后分裝凍存已經很長時間的樣品；

 

　　2.蛋白盡量純化，純度超過90%比較理想；

 

　　3.如果蛋白純化困難，并且analyte分子量超過5kD，可以考慮用抗體capture，如果這樣，用戶需要提供抗體，不接受未經任何提純處理的真核細胞裂解液；

 

　　4.純化后的蛋白溶液不要含有Tris、咪唑等含有氨基或亞氨基的化合物成分；

 

　　5.提供樣品分子量；

 

　　6.蛋白樣品請提供大致的等電點；

 

　　7.蛋白濃度盡量不低于30 mM(即微mol/L)。

 

　　8.樣品總量不少于10-15 nmol(摩爾數=質量/分子量)

 

　　9.如果樣品是核酸或多糖，請標記上biotin。

 

　　用于analyte(流動相分子)的樣品要求：

 

　　1.樣品應盡量純化，純度超過90%比較理想；

 

　　2.提供樣品分子量；

 

　　3.蛋白樣品如有可能，請提供大致等電點；

 

　　4.如果樣品是溶液，請提供準確的樣品濃度；

 

　　5.如果樣品是溶液，初始濃度可根據大致親和力水平調整：如果親和力可能較弱(KD>10-6 M)，濃度不應低于10mM，如果親和力較強(KD<10-6 M)，濃度可以低至10 mM；

 

　　6.如果樣品是粉末狀態，請提供準確質量和分子量信息以及溶解方式等；

 

　　7.樣品的總體積應當不少于10mL，最好能在50mL以上；

 

　　8.確保化合物在較低DMSO濃度的情況下具有良好的水溶解性。

 

　　緩沖液要求：

 

　　PBST緩沖液(10mM Na3PO4，150mM NaCl，0.01% Tween，pH=7.4)，如果實驗有特殊要求，請提供緩沖液，緩沖液總量不少于2 L，要用0.2mm濾膜過濾。

 

　　請查閱與所要做的蛋白和小分子相關的SPR文獻。

 

設備使用相關說明

 

　　蛋白質相互作用儀利用SPR(Surface Plasmon Resonance)技術，即表面等離子共振技術，可以在天然狀態下反映蛋白質-蛋白質、蛋白質-核酸、新藥分子-疾病靶蛋白等生物分子相互作用，如特異結合、解離、分子識別等動力學過程，為實時、動態獲取生物分子互作信息，從而闡明生命現象的分子機理提供了有效的研究工具，有助于更加全面和深刻地理解生物分子的結構和功能。