
激光共聚焦顯微鏡
內(nèi)容簡介
Confocal 利用放置在光源后的照明針孔和放置在檢測器前的探測針孔實(shí)現(xiàn)點(diǎn)照明和點(diǎn)探測,來自光源的光通過照明針孔發(fā)射出的光聚焦在樣品焦平面的某個(gè)點(diǎn)上,該點(diǎn)所發(fā)射的熒光成像在探測針孔上,該點(diǎn)以外的任何發(fā)射光均被探測針孔阻擋。照明針孔與探測針孔對(duì)被照射點(diǎn)或被探測點(diǎn)來說是共軛的,因此被探測點(diǎn)即共焦點(diǎn),被探測點(diǎn)所在的平面即共焦平面。計(jì)算機(jī)以像點(diǎn)的方式將被探測點(diǎn)顯示在計(jì)算機(jī)屏幕上,為了產(chǎn)生一幅完整的圖像,由光路中的掃描系統(tǒng)在樣品焦平面上掃描,從而產(chǎn)生一幅完整的共焦圖像。只要載物臺(tái)沿著Z軸上下移動(dòng),將樣品新的一個(gè)層面移動(dòng)到共焦平面上,樣品的新層面又成像在顯示器上,隨著Z軸的不斷移動(dòng),就可得到樣品不同層面連續(xù)的光切圖像 。
結(jié)果展示
I:面筋提取物顆粒染色拍照;II:乳膠顆粒染色拍照;III:生物膜細(xì)菌的死活分布3D圖;IV:細(xì)胞死活染色拍照;V:細(xì)胞內(nèi)線粒體定位;VI: 鬼筆環(huán)肽細(xì)胞骨架染色;VII: 組織免疫熒光(組織內(nèi)蛋白定位);VIII:細(xì)胞內(nèi)熒光探針成像;IX:細(xì)胞免疫熒光。
服務(wù)說明
送樣方式:
可接收自行處理好后用于直接拍攝的樣品,由我們提供拍攝服務(wù);也可以委托平臺(tái)做前處理,如需前處理請客戶務(wù)必于送樣單內(nèi)附上詳盡的實(shí)驗(yàn)方案和處理步驟;實(shí)驗(yàn)所需的細(xì)胞和試劑等可自行提供,也可以委托平臺(tái)代購。
需要您提供
1.可直接用于拍攝的片子(直接上機(jī)拍攝)
或者2.實(shí)驗(yàn)所需的樣品(含前處理方案+制片方法)
服務(wù)周期:
一般為樣品接收后的2-3周,具體實(shí)驗(yàn)周期及送樣時(shí)間請與客服溝通確認(rèn),謝謝!
收費(fèi)說明:
項(xiàng)目 |
價(jià)格 |
前處理費(fèi)用 |
依據(jù)具體實(shí)施方案議價(jià) |
2D模式拍攝 |
300元/樣起 |
3D模式拍攝 |
300元/樣起 |
試劑費(fèi)用 |
依據(jù)實(shí)際訂購價(jià)格 |
最終收費(fèi)以與工作人員溝通確定的價(jià)格為準(zhǔn)。
交付內(nèi)容:
2D模式每樣拍攝5-6個(gè)視野,3D模式每樣拍攝2-3個(gè)視野,結(jié)果反饋請?jiān)跍y試完成一周內(nèi),不建議回收樣品,如有需要請?zhí)崆胺答伣o工作人員。
服務(wù)簡介
激光掃描共聚焦顯微鏡(Confocal laser scanning microscope,簡稱CLSM)是近代生物醫(yī)學(xué)圖象儀器。它是在熒光顯微鏡成象的基礎(chǔ)上加裝激光掃描裝置,使用紫外光或可見光激發(fā)熒光探針。利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖象處理,從而得到細(xì)胞或組織內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)的熒光圖象,以及在亞細(xì)胞水平上觀察諸如Ca2+、pH值、膜電位等生理信號(hào)及細(xì)胞形態(tài)的變化。
利用放置在光源后的照明針孔和放置在檢測器前的探測針孔實(shí)現(xiàn)點(diǎn)照明和點(diǎn)探測,來自光源的光通過照明針孔發(fā)射出的光聚焦在樣品焦平面的某個(gè)點(diǎn)上,該點(diǎn)所發(fā)射的熒光成像在探測針孔上,該點(diǎn)以外的任何發(fā)射光均被探測針孔阻擋。照明針孔與探測針孔對(duì)被照射點(diǎn)或被探測點(diǎn)來說是共軛的,因此被探測點(diǎn)即共焦點(diǎn),被探測點(diǎn)所在的平面即共焦平面。計(jì)算機(jī)以像點(diǎn)的方式將被探測點(diǎn)顯示在計(jì)算機(jī)屏幕上,為了產(chǎn)生一幅完整的圖像,由光路中的掃描系統(tǒng)在樣品焦平面上掃描,從而產(chǎn)生一幅完整的共焦圖像。只要載物臺(tái)沿著Z軸上下移動(dòng),將樣品新的一個(gè)層面移動(dòng)到共焦平面上,樣品的新層面又成像在顯示器上,隨著Z軸的不斷移動(dòng),就可得到樣品不同層面連續(xù)的光切圖像。
樣品要求
1,細(xì)胞爬片、石蠟切片、冰凍切片等可用于激光共聚焦的樣本。
2,原樣可是固體原樣,也可以分散后的樣品,質(zhì)量10-50mg。
3,測試的具體要求信息。
檢測項(xiàng)目
可以直接現(xiàn)場進(jìn)行拍攝,也可以做委托測試
現(xiàn)場測試機(jī)時(shí)預(yù)約
平臺(tái)負(fù)責(zé)機(jī)時(shí)預(yù)約,客戶攜帶樣品前去實(shí)驗(yàn)室自主測試。
樣品委托測試
客戶提供樣品,平臺(tái)負(fù)責(zé)預(yù)約機(jī)時(shí)并安排技術(shù)老師去測試,之后發(fā)送結(jié)果給客戶。
樣品制樣
客戶不清楚如何制樣時(shí),平臺(tái)可提供制樣服務(wù),部分載樣工具需收取一定材料費(fèi)。
生物掃描電鏡(SEM)
內(nèi)容簡介
生物SEM介紹
生物掃描電鏡主要利用二次電子成像拍攝材料的表面三維形貌情況,拍攝照片為黑白照片;一般用來觀察細(xì)胞外表面的變形以及受損情況等,也可以觀察材料在細(xì)胞表面的分布情況,廣泛應(yīng)用于檢測生物樣品、非均相有機(jī)材料、無機(jī)材料等微米、納米范圍內(nèi)的表面特征。
服務(wù)說明
送樣方式:
可接收固定好的細(xì)胞/組織樣品并附有詳細(xì)送檢要求的送樣單
①需要您提供的樣品:收集細(xì)胞/組織取樣(新鮮迅速取材),置于1.5ml離心管內(nèi),加入2.5%的戊二醛溶液(固定液加滿離心管,使樣品完全浸沒在固定液中),放置于4℃過夜,請不要倒棄固定液,一般固定12h后可寄送。
②打印填寫完整的送樣單和樣品一起寄送。
樣品取材及固定常用方法
細(xì)胞類 |
106以上的細(xì)胞,用細(xì)胞刮刀刮下來,1500-3000轉(zhuǎn)離心,5-10min,收集細(xì)胞于1.5ml或2ml離心管,管底肉眼可見2-3粒大米狀樣品,如果細(xì)胞量很多,把細(xì)胞團(tuán)塊用細(xì)針尖挑成幾個(gè)小團(tuán)塊,棄上清,沿管壁緩慢加入4℃預(yù)冷的固定液,固定液完全浸沒樣品,然后放入4°C冰箱過夜。 |
組織類 |
新鮮取材,取材位置準(zhǔn)確,組織大小盡量在1-2mm³,離體取材后請盡快投入4℃預(yù)冷的固定液中,固定液完全浸沒組織,然后放入4°C冰箱過夜。 |
細(xì)菌類 |
吸取OD0.5-0.8的培養(yǎng)物,離心后棄培養(yǎng)基,收集菌體沉淀于管底黃豆大小,可以用PBS洗1-2次,齊上清,沿管壁緩慢加入4℃預(yù)冷的固定液,固定液完全浸沒樣品,然后放入4°C冰箱過夜。 |
*固定液的量請參考上圖,加至箭頭所示位置 |
|
*如樣品取材及固定有疑問請及時(shí)與 工作人員溝通 |
服務(wù)周期:
一般為樣品接收后的2-3周,具體實(shí)驗(yàn)周期及送樣時(shí)間請與工作人員溝通確認(rèn),謝謝!
收費(fèi)說明:
掃描電鏡全套服務(wù)(制片+拍攝) 500元/樣起。
最終收費(fèi)以與 工作人員溝通確定的價(jià)格為準(zhǔn)。
交付內(nèi)容:
每樣提供8-10張拍攝圖片,結(jié)果反饋請?jiān)跍y試完成一周內(nèi),不建議回收樣品,如有需要請?zhí)崆胺答伣o工作人員。
服務(wù)參數(shù)
1. 樣品預(yù)處理裝置
1.1組合式液氮泥預(yù)冷制備裝置,過冷液氮溫度為-210℃
1.2帶有樣品托裝載機(jī)構(gòu),可方便對(duì)接經(jīng)高壓冷凍處理或野外預(yù)冷樣品的
2.冷凍制備系統(tǒng)冷源
冷凍制備腔室和掃描電鏡冷臺(tái)、冷阱均采用過冷氮?dú)鈿饫浞绞剑?制備腔室冷臺(tái)和電鏡冷臺(tái)在10分鐘內(nèi)可從室溫降至-140℃以下,控溫精確;配置分體式安裝的21升液氮杜瓦瓶組件,無需補(bǔ)充液氮持續(xù)續(xù)運(yùn)行時(shí)間長達(dá)20小時(shí)
3.高真空冷凍制備裝置
3.1真空系統(tǒng)
渦輪分子泵抽氣系統(tǒng),制備腔室真空度優(yōu)于10-6 mbar量級(jí)(液氮冷卻時(shí));分子泵配有阻尼隔振裝置,60%以上的系統(tǒng)運(yùn)行時(shí)間內(nèi)前級(jí)旋轉(zhuǎn)機(jī)械泵無需工作
3.2 制備腔室冷臺(tái)和冷阱
冷凍制備腔室通過接口與電鏡腔室直接相連,方便樣品在冷凍制備腔室與電鏡冷臺(tái)之間的來回傳輸,具有重做樣品的能力
冷臺(tái):溫度范圍為-190℃ ~ +100℃;溫度穩(wěn)定度為1℃
冷阱:冷臺(tái)附近設(shè)有防污染冷阱,冷阱溫度可低至-190℃
3.3 樣品傳輸通道采用門閥密封,無需潤滑脂
3.4標(biāo)配斷裂操縱器冷刀組件斷裂裝置,可選高度可調(diào)的冷刀組件;可設(shè)置及貯存時(shí)間-溫度的升華參數(shù)曲線,全自動(dòng)升華操作;濺射鍍膜頭為低電壓冷濺射工作方式,標(biāo)配Pt靶,可選其它靶材,全自動(dòng)濺射鍍膜操作
4.樣品傳輸裝置
4.1結(jié)構(gòu)小巧,易操作
4.2密封方式:采用真空(壓差)及機(jī)械擰緊機(jī)構(gòu)雙重密封
5.掃描電鏡冷臺(tái)及冷阱
5.1掃描電鏡冷臺(tái)和冷阱
冷臺(tái):-190℃ ~ +100℃;溫度穩(wěn)定度為1℃
冷阱:-190℃或更低
冷臺(tái)和冷阱采用獨(dú)立的雙氣路冷卻
5.2電鏡腔室配有CCD相機(jī)及LED照明,可在觸摸屏上顯示電鏡腔室內(nèi)部樣品及樣品臺(tái)圖像
6.觸摸屏控制
允許用戶自定義方案,可快速輸入和儲(chǔ)存方案以便隨時(shí)訪問調(diào)用,可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)濺射及自動(dòng)升華刻蝕的功能,并且具有屏幕幫助及操作提示功能。通過CCD相機(jī),屏幕可顯示制備腔室和掃描電鏡腔室內(nèi)部的圖像
服務(wù)簡介
功能:普通掃描電鏡服務(wù)及冷凍掃描電鏡服務(wù)。
掃描電鏡冷凍傳輸系統(tǒng)與場發(fā)射掃描電鏡相結(jié)合,通過升華、斷裂等方法可直接在含水狀態(tài)下觀察樣品形貌,且無皺縮變形、可溶成分也被保留,是不失真觀察生物樣品精細(xì)結(jié)構(gòu)的最有效方法。
特點(diǎn):該系統(tǒng)可與當(dāng)今主流的場發(fā)射掃描電鏡相結(jié)合,具有操作簡便、形貌保真的特點(diǎn)。
檢測項(xiàng)目
適用于液體、半液體、生命材料及其它對(duì)各種干燥敏感的樣品(如溶膠、高分子材料等)的制備。
生物透射電鏡(TEM)
內(nèi)容簡介
生物TEM介紹
生物透射電鏡是觀察和研究超微結(jié)構(gòu)的重要工具,可用于觀察細(xì)胞整體結(jié)構(gòu)、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。生物細(xì)胞樣品內(nèi)部形態(tài)觀察建議用專門應(yīng)用于生物樣品觀察的透射電鏡,其電壓在80-120kv可以降低生物樣品因高能電子束輻射而損傷的影響,同時(shí)依賴于生物樣品制備技術(shù)的發(fā)展,如超薄切片技術(shù)、負(fù)染色技術(shù)、冷凍制樣技術(shù)、細(xì)胞化學(xué)技術(shù)等,廣泛應(yīng)用于組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)、病毒學(xué)、病理學(xué)及材料學(xué)等多個(gè)學(xué)科的研究中,如常用來觀察細(xì)胞整體結(jié)構(gòu)、細(xì)胞膜細(xì)胞壁細(xì)胞器的變化、材料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部的分布情況、細(xì)胞應(yīng)付外界刺激產(chǎn)生的自噬小體,以及外界生物入侵的侵染結(jié)構(gòu)等等。
服務(wù)說明
送樣方式:
可接收固定好的細(xì)胞/組織樣品并附有詳細(xì)送檢要求的送樣單
①需要您提供的樣品:收集細(xì)胞/組織取樣(新鮮迅速取材),置于1.5ml離心管內(nèi),加入2.5%的戊二醛溶液(固定液加滿離心管,使樣品完全浸沒在固定液中),放置于4℃過夜,請不要倒棄固定液,一般固定12h后可寄送。
②打印填寫完整的送樣單和樣品一起寄送。
樣品取材及固定常用方法
細(xì)胞類 |
106以上的細(xì)胞,用細(xì)胞刮刀刮下來,1500-3000轉(zhuǎn)離心,5-10min,收集細(xì)胞于1.5ml或2ml離心管,管底肉眼可見2-3粒大米狀樣品,如果細(xì)胞量很多,把細(xì)胞團(tuán)塊用細(xì)針尖挑成幾個(gè)小團(tuán)塊,棄上清,沿管壁緩慢加入4℃預(yù)冷的固定液,固定液完全浸沒樣品,然后放入4°C冰箱過夜。 |
組織類 |
新鮮取材,取材位置準(zhǔn)確,組織大小盡量在1-2mm³,離體取材后請盡快投入4℃預(yù)冷的固定液中,固定液完全浸沒組織,然后放入4°C冰箱過夜。 |
細(xì)菌類 |
吸取OD0.5-0.8的培養(yǎng)物,離心后棄培養(yǎng)基,收集菌體沉淀于管底黃豆大小,可以用PBS洗1-2次,齊上清,沿管壁緩慢加入4℃預(yù)冷的固定液,固定液完全浸沒樣品,然后放入4°C冰箱過夜。 |
*固定液的量請參考上圖,加至箭頭所示位置 |
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*如樣品取材及固定有疑問請及時(shí)與工作人員溝通 |
服務(wù)周期:
一般為樣品接收后的3-4周,具體實(shí)驗(yàn)周期及送樣時(shí)間請與工作人員溝通確認(rèn),謝謝!
交付內(nèi)容:
每樣提供8-10張拍攝圖片,結(jié)果反饋請?jiān)跍y試完成一周內(nèi),如需回收剩余物料及切片,請?zhí)崆皞渥⑶宄瑯颖净厥漳J(rèn)測試完成一周后寄出,如需盡早回收樣本,請及時(shí)反饋給工作人員。
服務(wù)簡介
以動(dòng)物模型及體外培養(yǎng)細(xì)胞模型為研究對(duì)象,研究疾病的發(fā)生發(fā)展規(guī)律,從而闡明疾病本質(zhì)的生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)學(xué)科。超微病理學(xué)技術(shù)是研究疾病的病因、發(fā)生發(fā)展機(jī)制,以及其形態(tài)和功能變化等的重要手段之一。超微病理學(xué)技術(shù)主要分為標(biāo)本制作和電鏡分析。
樣品要求
標(biāo)本類型主要有動(dòng)植物組織器官、培養(yǎng)及脫落細(xì)胞、細(xì)菌、真菌、藍(lán)藻等,均需進(jìn)行以下制樣過程。
1.固定 標(biāo)本離體或離開原生活狀態(tài)1分鐘后立即投入4℃預(yù)冷的2.5%戊二醛緩沖電鏡固定液中,取材時(shí)應(yīng)絕對(duì)避免擠壓、損傷,推薦大小為1mm3 或者截面積為1mm2的5mm長條隨后送檢。
2.標(biāo)本制作 送檢后標(biāo)本需經(jīng)過四氧化鋨后固定、脫水、樹脂半浸透、樹脂全浸透、樹脂包埋、高溫聚合、超薄切片及染色。
透射電鏡生物樣品取材基本要求
第一 取材準(zhǔn)備
1) 試劑 所需 2.5%戊二醛、0.1M PH7.35 的磷酸鹽緩沖液,注明配制日期及啟用日期,置于 4 攝氏度冰箱預(yù)冷(2.5%戊二醛預(yù)冷至少 1 小時(shí)以上;磷酸鹽緩沖液不宜長時(shí)間預(yù)冷,容易結(jié)晶)。
2) 儀器與器材 鋒利刀片(手術(shù)刀片或飛鷹雙面刀片)、鑷子、低溫操作臺(tái)、1.5mlEP管、培養(yǎng)皿(或者硬紙卡,盛戊二醛用)、注射器(植物組織用)、冷凍離心機(jī)(細(xì)菌、細(xì)胞、藻類等需要離心的樣品使用)
2. 取材要求
1) 快
取材動(dòng)作要迅速,材料離體后 1min 鐘內(nèi)必須進(jìn)入戊二醛固定液,使組織、細(xì)胞盡可能保持原來生活狀態(tài),解剖器械要用鋒利的刀片(新的手術(shù)刀片或飛鷹雙面刀片)劃切,避免牽拉或擠壓,盡量減少取材中的機(jī)械損傷。(動(dòng)物處死后 5min 內(nèi)完成此步驟,時(shí)間越短越好!)
2) 準(zhǔn)
取材要準(zhǔn)確
①器官要準(zhǔn)確;
②部位要準(zhǔn)確:如觀察腎臟腎小球或腦神經(jīng)元需取皮質(zhì)而不要取髓質(zhì),觀察胰島盡量取胰尾。
③胃腸道、皮膚、角膜、視網(wǎng)膜、耳蝸、骨骼肌等要注意方向性(橫切或縱切),取材成條狀(0.5mm×1mm×3mm),確保要觀察的部位在較長的切面上。
3) 冷
取材過程應(yīng)在 0~4 攝氏度的操作臺(tái)上操作(或者是冰上操作,但要注意切勿使組織直接接觸或貼近冰面,需要以操作面板隔離,以免操作時(shí)間過長而造成組織結(jié)冰出現(xiàn)冰晶損傷),所有器械、容器、2.5%戊二醛、PBS 需 4℃預(yù)冷足夠長的時(shí)間。
4) 小
不定位組織大小為 1mm×1mm×1mm(盡可能小,可以更小為 0.5mm×0.5mm×1mm,越薄越好),如肝、肺、脾等不需要看特定結(jié)構(gòu)的非定位器官組織;定位組織如神經(jīng)、骨骼肌、腎、腦、腸、血管、胰島等組織取材大小為 0.5mm×1mm×3mm的長條狀(越薄越好)。
第二 不同樣本的取材方法
生物器官組織取材
1. 浸入固定 麻醉(1%戊巴比妥鈉銨 5ml/kg 體重腹腔注射)或斷頭急性處死,解剖出所需器官,用解剖刀(鋒利刀片)取一小塊組織,立即(越快越好,1~3min 完成此操作)放入盛有預(yù)冷 2.5%戊二醛的培養(yǎng)皿(或硬紙片上)中,隨后立即沿小塊組織邊緣(已經(jīng)被固定)用鋒利刀片取 1mm×1mm×1mm 或 0.5mm×1mm×3mm 大小組織置于盛有預(yù)冷 2.5%戊二醛 1.5mlEP 管中繼續(xù)固定,4℃保存(請勿靠近冰箱邊上造成標(biāo)本冷凍結(jié)冰!!!)。
2. 灌注固定 腦組織等(初次取材者或未常規(guī)做灌注固定者此方法慎用,因在 TEM 結(jié)果出來前無法評(píng)價(jià)其固定是否成功)。
培養(yǎng)細(xì)胞取材
1. 貼壁細(xì)胞 培養(yǎng)好的細(xì)胞不經(jīng)漂洗直接倒出培養(yǎng)液后迅速加足量預(yù)冷 2.5%戊二醛固定10min,隨后用細(xì)胞鏟或細(xì)胞刷成 45°鈍角鏟下細(xì)胞(勿用胰蛋白酶消化)后全部轉(zhuǎn)移到15~50ml 離心管內(nèi),轉(zhuǎn)速 800rpm 離心 5min,隨后去除大部分上清液(留 1ml 左右),將離心管里的細(xì)胞輕輕吹散后轉(zhuǎn)移到 1.5ml 的 EP 管內(nèi)1000~1500rpm(盡量低轉(zhuǎn)速,視不同細(xì)胞而言,建議先做一個(gè)轉(zhuǎn)速梯 800、1000、1500rpm 度試驗(yàn),找到最低可以離心成團(tuán)的轉(zhuǎn)速)離心 5~10min 成團(tuán)(細(xì)胞團(tuán)大小約半個(gè)至一個(gè)綠豆大小為宜)。離心完成后輕輕吸去上清液,管底的細(xì)胞團(tuán)不要打散,沿管壁緩緩倒入適量的預(yù)冷 2.5%戊二醛,隨后置于4℃冰箱固定。(此過程操作輕柔,切勿損傷細(xì)胞!)
2. 懸浮細(xì)胞 直接將細(xì)胞培養(yǎng)液全部轉(zhuǎn)移到 15~50ml 離心管內(nèi),轉(zhuǎn)速 800rpm 離心 5min,隨后去除大部分上清液(留 1ml 左右),將培養(yǎng)管里的細(xì)胞輕輕吹散后轉(zhuǎn)移到 1.5ml 的 EP管內(nèi),1000~1500rpm(盡量低轉(zhuǎn)速,視不同細(xì)胞而言,建議先做一個(gè)轉(zhuǎn)速 800、1000、1500rpm 梯度試驗(yàn),找到最低可以離心成團(tuán)的轉(zhuǎn)速)離心 5~10min 成團(tuán)(細(xì)胞團(tuán)大小約半個(gè)至一個(gè)綠豆大小為宜)。離心完成后輕輕吸去上清液,管底的細(xì)胞團(tuán)不要打散,沿管壁緩緩倒入適量預(yù)冷 2.5%戊二醛,隨后置于 4℃冰箱固定。(此過程操作輕柔,切勿損傷細(xì)胞!)
3. 細(xì)菌懸液(固體培養(yǎng)基自行轉(zhuǎn)移成懸浮液) 直接將細(xì)菌懸液全部轉(zhuǎn)移到 15~50ml 離心管內(nèi),轉(zhuǎn)速 800~1500rpm 離心 5min,隨后去除大部分上清液(留 1ml 左右),將培養(yǎng)管里的細(xì)胞輕輕吹散后轉(zhuǎn)移到 1.5ml 的 EP 管內(nèi),1500~3000rpm(視不同細(xì)菌而言,自行加大轉(zhuǎn)速,建議不超過 5000rpm)離心 5~10min 成團(tuán)(細(xì)胞團(tuán)大小約半個(gè)至一個(gè)綠豆大小為宜)。離心完成后輕輕吸去出上清液,管底的細(xì)胞團(tuán)不要打散,沿管壁緩緩倒入適量預(yù)冷 2.5%戊二醛,隨后置于 4℃冰箱固定。(此過程操作輕柔,切勿損傷細(xì)菌!)
植物組織取材
植物取材較容易,取一小塊植物組織浸入盛有預(yù)冷 2.5%戊二醛培養(yǎng)皿(或硬紙卡)上,隨后用鋒利刀片切成 0.5mm×0.5mm×3mm 小長條薄片,隨后抽取氣體。 抽取氣體 將植物組織同固定液一起倒入注射器,用乳膠手套食指堵住注射器出口,右手拉動(dòng)針?biāo)ǎ瑢⒆⑸淦骺诖怪毕蛏希砷_食指,右手輕推針?biāo)ㄊ挂好嫔系臍馀輳淖⑸淦骺谂懦觯磸?fù)多次,直至組織沉入固定液。
透射電鏡生物樣品運(yùn)輸基本要求
用封口膜將 1.5mlEP 管管蓋再次封好,做好標(biāo)記,填好送樣申請單(必須填,隨樣品寄出紙質(zhì)版申請單)。隨后插在海綿板或可以減震的塑料上,用廢舊報(bào)紙包裹,放入 1~2 個(gè)冰袋,樣品盡可能遠(yuǎn)離冰袋固定放置,以防樣品出現(xiàn)冰晶損傷,寄出。
檢測項(xiàng)目
一. 樣品包埋 送檢后標(biāo)本需經(jīng)過四氧化鋨后固定、脫水、樹脂半浸透、樹脂全浸透及樹脂包埋后高溫聚合。
二. 超薄切片 聚合后的組織樹脂包埋塊須在萊卡EM UC7超薄切片機(jī)下定位后,切下50-70nm薄片,隨后用銅網(wǎng)撈片。
三. 鉛鈾染色 制作好的樣品銅片經(jīng)醋酸鈾染色10min,后硝酸鉛再染色10min,即可閱片
四. 拍照分析 按照客戶拍照目的及拍照要求進(jìn)行分析。