預約須知

1，樣品量需要提供粉末20mg以上，液體5-10ml；

2，送樣前需要自行確認好樣品在指定流動相中的溶解性，難溶樣品最好自行溶好再送樣, 溶解后的樣品要透明均一，過濾頭不堵；

3，樣品溶好之后，有機相樣品需要過0.45 μm濾膜，水相樣品需要過0.22 μm濾膜，樣品濃度一般控制在2-5mg/mL；

4，如果對測試有特殊要求，請聯(lián)系相關負責老師或撥打客服熱線。

400-831-0631400-831-0631

 

GPC

型號：島津 CTO-20A  Waters 1515

 

測試項目：

a. 常溫流動相: 水相、THF、DMF、DMSO、三氯甲烷、六氟異丙醇、a-氯奈；

b. 高溫流動相：DMF（80℃），三氯苯；

c. 可以測相對分子量的流動相：水相、THF、DMF、DMSO、三氯甲烷、六氟異丙醇、a-氯奈、三氯苯

d .可以測絕對分子量的流動相：水相、THF、DMF、三氯苯

更多測試要求請咨詢客戶經(jīng)理或者撥打全國客服電話;

樣品要求：

1. 樣品狀態(tài)：可為液體、粉末、塊狀樣品;

2.樣品要求在指定流動相中有較好的溶解性，樣品量要求10mg左右。

3.如果樣品溶解性較差，要求提前溶解好（濃度要求在2-5mg /ml左右），或者提供合理溶解方法（如果方法太復雜，費用問題需要提前咨詢客戶經(jīng)理）

 

常見問題及回答：

為什么樣品要求在指定流動相中溶解性要好？

因為GPC（凝膠滲透色譜）本質上是一個色譜測試，是通過色譜柱分離不同分子量的成分，溶解性不好的話是需要過濾后測試的，不溶成分的分子量就無法測試，而且如果樣品溶解度差的話，樣品有可能會在色譜柱析出，毀壞柱子。

 

為什么測試結果跟預期分子量差別較大？

第一，gpc的測試原理是每種流動相都有對應的一種標準物質作出的標準曲線，樣品測試結果要跟標曲比較，然后得出測試結果，所以大多數(shù)流動相得到的結果是樣品的相對分子量，如果樣品跟標準品差別太大的話，測試結果就有可能跟真實值相差較大；第二，GPC一般測試樣品都是聚合物，預期分子量只是基于實驗設計的一個預期值，所以有時候跟實際情況有出入也是正常的。

 

相對分子量和絕對分子量的區(qū)別？

第一，測試原理不同：相對分子量時通過建立標準物質的標準曲線，待測樣品與之相比得到分子量分布；絕對分子量是通過三聯(lián)檢測器，主要是激光檢測器在樣品顆粒表面散射角度不同通過數(shù)學模型計算分子量分布；第二，檢測器不同：相對分子量主要是折光示差檢測器，絕對分子量需要示差，濃度，激光三聯(lián)檢測器；第三，檢測分子量范圍不同：相對分子量可以檢測較小分子量，而一般分子量在幾萬以上才適合絕對分子量

 

結果展示及說明：

測試結果給出的是PDF格式和excel格式數(shù)據(jù)，下邊分別是DMF相對分子量和水相GPC絕對分子量示例。

 

服務簡介

凝膠滲透色譜是一種液相色譜，原理是利用高分子溶液通過一根裝填有凝膠的柱子，在柱中按分子大小進行分離。

柱子為玻璃柱或金屬柱，內填裝有交聯(lián)度很高的球形凝膠，球形凝膠本身有很多按一定分布的大小不同的孔洞，根據(jù)大小分子不同的行程可以把混在一起的高聚物分子逐級分離開來，先分離出來的是大分子，較小的聚合物分子受到溶劑分子的排斥也隨后分離出來，然后再用一定的方法檢知每級中溶質的濃度和分子量。

凝膠色譜（GPC）可測定高分子聚合物（含烯烴類高聚物）、低聚物、糖類、蛋白質等的平均分子量，分子量分布，分子量分布寬度，分析共聚物中均聚物及雜質。

 

檢測項目

THF,氯仿相要求分子量500-150萬 ，DMF流動相要求分子量大于2000-150萬，絕對分子量測試要求分子量大于3000.（數(shù)均分子量小于500的測不準，數(shù)據(jù)處理會存在誤差）

絕對分子量目前僅支持 四氫呋喃、氯仿相

 

樣品要求

1. 樣品必須可以充分溶解于所選流動相；

2. 固體樣品量要求至少10mg；請事先嘗試溶解樣品，濃度范圍：2-3mg/ml

3. 液體樣品量不少于2mL，濃度最好大于5mg/mL, 具體濃度請告知

 

常見問題及解答

樣品可以部分溶解，取上清液可否進行測試？

不可以，因為溶解性不好的話不溶成分的分子量就無法測試，而且如果樣品溶解度差的話，樣品有可能會在色譜柱析出，毀壞柱子。

水相GPC如何看圖說明：

每個樣品有2個測試報告: 原始數(shù)據(jù)和PDF測試報告。

測試數(shù)據(jù)一般看Mw(重均分子量)、Mn(數(shù)均分子量)、Mp(最高峰的分子量)、Mz/Mz+1(更高的平均分子量)、峰面積，多分散性等幾個比較重要的數(shù)據(jù)，客戶可根據(jù)自己需要參看測試報告。

舉例說明：

 

 

小于1000分子量，或者大于100萬分子量的出峰區(qū)域不能積分出Mw等數(shù)據(jù)，如果確實需要再反饋，可以利用數(shù)據(jù)校正，模擬計算出相應的數(shù)據(jù)。

GPC軟件每次只能積分一個出峰面積，故存在多分布譜圖，多次積分截圖給Mw等數(shù)據(jù)。

論文中怎么寫GPC測試方法（詳細版本，根據(jù)需要酌情精簡）

凝膠滲透色譜（GPC）分析（以水相為例）

①待測樣品制備

取樣 0.30 g 加入5 mL 樣品瓶中，并加入含 0.1 mol/L硝酸鈉的超純水至刻度線，超聲分散后待測。

②GPC 分析測試條件

泵：Waters 1515 Isocratic HPLC Pump；

色譜柱：ULTRAHYDROGEL 120 PKGD，ULTRAHYDROGEL 250 PKGD，ULTRAHYDROGEL 500 PKGD；

檢測器：Waters 2414 Refractive Index Detector；

流動相：含有 0.1 mol/L 硝酸鈉的超純水；

流量：1 mL/min；

樣品濃度：25~35 mg/mL；

標準樣品為Polymer Standards Service-USA Inc.提供的窄分布聚乙二醇，分子量分別為Mp=330000、176000、82500、44000、25300、20600、12600、7130、4290、1400、633、430。

描述聚合物分子量的Mw，Mw和Mz有什么不同？

我們在研究聚合物的鏈長和分子量分布時，常常遇到這樣的困惑，表征一個聚合物分子量往往涉及到下列參數(shù)：數(shù)均分子量Mn，重均分子量Mw，更高的平均分子量Mz以及粘均分子量 Mv。這些參數(shù)究竟有什么不同呢？不急，且聽我慢慢分解

 

聚合物是由重復單元（單體）通過化學鍵合形成的長鏈。如需了解聚合物的物理性質（如機械強度、溶解性和脆性），就需要首先了解聚合物鏈長度方面的相關知識。鏈長通常以聚合物鏈的分子量表示，與單體的相對分子量和鏈中單體的數(shù)目相關。然而，所有的合成聚合物都具有多分散性，包含有長度不等的聚合鏈，所以聚合物的分子量不是一個單一值，而是一個聚合物鏈長和分子量的分布范圍。因此聚合物的分子量必須通過計算樣品中所有聚合物鏈分子量的平均值來描述。

 

數(shù)均分子量Mn

數(shù)均分子量是樣品中所有聚合鏈分子量的統(tǒng)計平均值，其定義如下其中Mi代表單鏈分子量，Ni代表具有相應分子量的鏈數(shù)目。Mn可以通過聚合機制來進行預測，并通過測定給定質量樣品中的分子數(shù)量來確定；例如端基分析等依數(shù)性方法。如果用Mn來表征分子量分布，則Mn兩側分布有同等數(shù)量的分子。

 

重均分子量Mw

重均分子量如下定義相對于Mn，Mw測定平均分子量時把單鏈分子量大小對Mw的貢獻也考慮進去。鏈的質量越大，對Mw的貢獻也越大。通過靈敏地測定分子大小，而不只是測定其數(shù)量的方法來確定Mw，如運用光散射技術。如果用Mw表征分子量分布，則Mw兩側分布有同等重量的分子。

 

更高的平均分子量Mz, Mz+1

通常，一系列的平均分子量可以由下面的方程定義

當n=1時，M=Mw
n=2時，M=Mz
n=3時，M=Mz+1

更高的平均分子量更多地依賴于高分子量的組分，因此也就更難以進行精確測定。通常需要使用諸如擴散和沉降等技術測量聚合物分子的行為來進行測定。雖然Z均分子量不常用于表征聚合物，但還是有幾種重要的方法能夠通過測定鏈長獲得Z均分子量。

針對所有合成的多分散性聚合物

Mn<Mw<Mz<Mz+1

 

多分散性指數(shù)

用于衡量聚合物分子量分布的廣度，其定義如下Mw/Mn多分散性指數(shù)越大，分子量分布越廣。所有鏈長都相等的單分散聚合物（如蛋白質），其Mw/Mn=1。經(jīng)過最佳控制合成的合成聚合物（用于校正的窄分子量分布聚合物），其Mw/Mn值應在1.02到1.10。逐步聚合反應生成高聚物的Mw/Mn值通常在2.0左右，而連鎖聚合反應產(chǎn)物的Mw/Mn值在1.5到20之間。

 

粘均分子量 Mv

用粘度法測得的聚合物的分子量。在所有的聚合物分子量的測定方法中，粘度法盡管是一種相對的方法，但因它儀器設備簡單，操作便利，分子量適用范圍大，又有相當好的實驗精確度，所以成為人們最常用的實驗技術。

 

GPC/SEC測定的平均分子量和Mp

SEC是唯一一種在測定聚合物整體分布時，能同時測定Mn、Mw、Mz和Mz+1的技術。SEC也可以對另一種平均分子量Mp進行計算，峰分子量Mp定義如下

Mp=最高峰的分子量

因此，Mp也是分子量分布的一種表達方式。Mp用于表征分子量分布極窄的聚合物，如校準聚合物標準品。